突触前定位rAAV-hSyn-mGFP-2A-Synaptophysin-mRuby
仅供科研使用
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应用于光遗传学(Optogenetics)技术中。病毒感染神经元后,感光的氯离子泵在细胞膜上表达。当给黄光时,氯离子泵被激活,氯离子内流从而可以抑制神经元的活动,即光抑制。
rAAV:Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
hSyn:human Synapsin I,成熟神经元特异性启动子。
2A:是一个短肽序列,当核糖体翻译到它的时候会自动跳开,继续翻译下游的阅读框,从而使同一个阅读框翻译成两个独立的蛋白。常用的2A序列包括T2A和P2A。
Synaptophysin-mRuby:是mRuby和Synaptophysin的融合蛋白,Synaptophysin蛋白定位于突触囊泡上,是一个突触的标志物。Synaptophysin-mRuby可以用来标记突触的位置。mRuby的激发波长是559nm,发射波长是600nm,属于红色荧光蛋白。
1.4℃短期保存;-80℃长期保存;每冻融一次,滴度降低10%,应避免反复冻融;
2.病毒于-80℃可长期保存 6个月以上;但如果病毒储存时间超过 6个月,建议在使用前重新测定病毒滴度。
病毒稀释和分装:
1.根据实验需要,病毒可适当稀释且分装成每次实验所需体积
2.用无菌离心管和枪头进行分装操作
3.推荐戴手套和护目镜进行操作
4.病毒稀释分装需在冰上操作
病毒储存:
1.检查超低温冰箱是否正常运转,尽可能快速完成存放操作
2.使用具有隔温功能的手套,防止被干冰或冰箱内物品冻伤
3.接触装有病毒的离心管时需戴一次性手套或橡胶手套
rAAV是复制缺陷的假病毒载体,安全无害。但使用者在操作中也需要保持一定的警惕性,一般情况下可在BSL-1中操作,对于携带致病基因或有害因子基因的AAV载体则应归BSL-2。
灭活:1%次氯酸钠,2%戊二醛,0.25%十二烷基硫酸钠,高温高压等处理方式。
请在签收病毒时检查和确认:
a、外包装是否完整 b.干冰是否有剩余 c.其他可疑现象
(如有问题请及时和我们联系)
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