近年来,腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)已成为基因治疗药物常用的递送载体工具。然而,在临床治疗中,AAV特异性抗体在一定程度上会降低基因治疗的效果,这极大限制了AAV基因治疗的推广。另一方面,AAV抗体的效价在个体内会随着时间的推移而变化,治疗中产生的抗体也可能会阻碍患者使用相同的基因治疗方案进行二次治疗,这将对基因治疗药物的时效性产生一定的限制。
图1 AAV中和抗体抑制载体转导和转基因表达的机制
● 临床治疗前检测:为AAV基因治疗药物的血清型选择、给药途径、药物剂量等方案制定提供依据。
● 临床治疗中检测:通过观测NAbs变化趋势,可评价基因治疗药物是否达到药效剂量水平、药效作用及持续时间。
利用我司不同AAV血清型病毒,模拟抗体阻断病毒进入细胞的生物过程,以检测血清/抗体对AAV病毒是否具有中和活性,及计算血清/抗体中AAV抗体的中和效价。
● 细胞选择:HEK 293
● 检测方案:AAV病毒与梯度稀释的待检血清/抗体共孵育后侵染细胞;48h后,使用全波长多功能微孔板检测仪检测各血清/抗体稀释度下的荧光强度,与未加血清/抗体情况下病毒的侵染情况比较,通过IC50分析,评价待检抗体或血清的中和效果。
● 客户提供样品要求:
a. 样本类型:血清、体液、玻璃体液等样本,干冰运输;
b. 样本体积:>30μl(特殊需求,可定制);
c. 样本要求:无菌,乙肝、丙肝、HIV、梅毒、EB、CMV等检测阴性;
d. 种属:人、猴、鼠等。