活动依赖产品-产品武汉枢密脑科学技术有限公司

产品及应用

活动依赖产品

背景

当细胞内无四环素或其衍生物多西环素时，抑制型Tet-off基因调控表达系统可开启目的基因的表达，而当有多西环素或者四环素时，目的基因表达关闭。激活型Tet-on基因调控系统在没有多西环素或者四环素时，基因表达关闭，而在有多西环素或者四环素可激活下游基因的表达。利用上述系统制备的rAAV病毒产品可在有无四环素的调节下，开启或关闭目的基因的表达，可应用于辅助病毒、光遗传、化学遗传及重组酶等中，控制功能基因的表达。

TRE四环素诱导系统、tTA四环素诱导系统

Tet（四环素）是一种用于诱导基因表达的调控系统，是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的。其包括抑制型系统Tet-off和激活型系统Tet-on，其中后者由前者演化而来。Tet-off基因调控表达系统由调节表达载体和反应表达载体两部分组成，调节表达载体含有启动Tet转录活化因子（tetracycline transcriptional activator,tTA）表达的启动子，反应表达载体由TRE-tight启动子（TRE3g）及目的基因组成。当细胞内无四环素或其衍生物多西环素（doxcycline,Dox）存在时，tTA与TRE结合，从而使目的基因得以表达；而当有多西环素或者四环素存在时，tTA中的Tet R的构象会发生变化，随后tTA从TRE上脱落，目的基因表达关闭；当调节蛋白质由tTA变为逆向Tet转录活化因子（reverse tetracycline transcriptional activator,rtTA）后，抑制型Tet-off基因表达调控系统便变成了激活型Tet-on调控系统。即在没有多西环素或者四环素时，其不能结合到TRE上，因而基因表达关闭；而在有多西环素或者四环素存在时则其会结合在TRE上，从而激活下游基因的表达。

产品信息

仅供科研使用

滴度：≥2.00E+12 vg/mL；

血清型：9型；

tTA：tetracycline transcriptional activator,Tet转录活化因子。

TRE3G：四环素诱导表达，时间特异性启动/关闭。

RAM：optimized synthetic activity-regulated promoter，优化合成的活动依赖启动子。

d2TTA：与传统tTA相比，使用d2tTA可显著降低基础表达、更严格的Dox调控及提高诱导倍数7-8倍。

图1.RAM启动子(PRAM)和rAAV-RAM系统

产品列表

功能描述	产品编号	产品名称	启动子	Cre/Flp依赖	参考文献
活动依赖（Activity-dependent）
RAM结合 Tet-off系统	PT-0627	rAAV-RAM-d2TTA::TRE-EGFP	RAM/TRE	-	eLife PMID:27661450
	PT-0626	rAAV-RAM-d2TTA::TRE-hChR2(H134R)	RAM/TRE	-
	PT-0747	PFD-rAAV-RAM-d2TTA::TRE-ArchT-EGFP	RAM/TRE	-
	PT-0746	PFD-rAAV-RAM-d2TTA::TRE-FLEX-tdTomato	RAM/TRE	Cre依赖
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