图1 HSV-1结构（A Handbook of Gene and Cell Therapy）

单纯疱疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）是一种有包膜的大型双链 DNA 病毒，其基因组大小范围为 150 至 240 kb，编码约90个病毒蛋白，平均直径180nm，其中包括一个125 nm的二十面体衣壳。常用HSV载体分为可复制性溶瘤载体和复制缺陷型基因治疗载体。

溶瘤HSV病毒（Oncolytic HSVs, oHSVs）是指通过基因工程改造，可选择性地在肿瘤组织内复制，进而感染并杀伤肿瘤细胞。 HSV具有感染宿主范围广、感染效率高、复制周期短、基因组容量大、致病性弱等优点。另外抗病毒药物如阿昔洛韦（acyclovir)或丙氧鸟苷（ganciclovir)有较好抑制病毒复制的作用，因此，近年来HSV-1作为溶瘤病毒产品被广泛的研究和应用。

图2 HSV-1基因组结构

HSV基因组由两个独特的长结构组成序列(长(UL)和短(Us))，它们的两侧都有一对反向的重复区TRL-IRL和IRs-TRs。UL和Us之间有一个“a”序列置于IRL和IRs之间的交界处。

T-VEC是第一个获得美国食品和药物管理局（FDA）批准的OVs，用于治疗转移性黑色素瘤。当瘤内给予T-VEC时，会导致肿瘤细胞死亡并作为抗原募集免疫细胞到肿瘤微环境中，随后引发T细胞诱导全身性抗肿瘤免疫反应。从此，溶瘤病毒药物将成为未来最具有潜力和应用前景的恶性肿瘤治疗手段之一。

T-VEC通过细胞表面疱疹病毒糖蛋白进入癌细胞，有利于复制并最终触发细胞裂解。通过这种方式，肿瘤源性抗原（TDA）、GM-CSF和新的病毒颗粒被释放出来，一次性感染周围的肿瘤细胞并增强TDA的扩散。此外，相关的分子通路被激活，引起全身抗肿瘤作用和完全免疫反应。

图3 T-VEC作用机制（PMID: 33803762）

枢密科技拥有oHSVs的重组改造、拯救、扩增等技术。通过此技术，我们可以根据客户需求，设计最优路径，灵活高效地实现oHSVs突变和重组毒株的构建。例如，对常用oHSV-1病毒的ICP34.5（RL1）、ICP47、US11、TK等特定基因进行敲除，使其具有肿瘤选择性。另一方面，在特定位点插入外源基因，如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、IL12等增强免疫反应。为了进一步提高其肿瘤靶向性和安全性，我司可根据客户需求对HSV-1进行改造。我司拥有HSV-1毒株种类有KOS株、F株、H129株。

图4 使用我司改造生产的HSV病毒颗粒（产品编号：H06001）

感染BHK21细胞24小时后进行拍摄