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技术与服务

蛋白表达

蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。

服务内容

哺乳动物细胞瞬时表达服务

BEV-昆虫细胞蛋白表达服务

酵母蛋白表达服务

大肠杆菌-原核蛋白表达服务

周期: 4-6周

周期: 4-8周

周期:6-10周

周期: 2-6周


• 高效表达载体
• 高密度细胞培养
• 专用前导序列和接头
• 优化筛选的哺乳动物细胞表达系统


• 优化的表达载体

• 高效表达胞内和胞外蛋白
• 大规模蛋白表达生产能力
• 高滴度病毒包装技术

• 简单的培养条件

• 多种胞内、胞外表达方案

• 优化筛选高表达菌株

• 大规模蛋白表达生产能力

• 快速、经济

• 多种表达载体和E. coli 细胞

• 丰富的周质空间表达经验

• 多种蛋白纯化和蛋白复性技术

产品信息

1.哺乳动物细胞瞬时表达服务

服务步骤

服务内容

交付内容

交付周期

载体构建

(1)基因合成及密码子优化(可选)

(2)片段构建至合适的表达载体

(1)表达质粒1-5ug

(2)表达质粒测序报告

(3)蛋白产品0.1-5mg,纯度大于85%

(4)蛋白产品报告书

1-3

细胞转染

(1)质粒转染细胞

(2)发酵条件优化表达检测

(3)小试样品纯化

1-2

放大发酵

(1) 放大发酵

(2) 蛋白纯化

(3) 蛋白质检报告

1-2


2.BEV-昆虫细胞蛋白表达服务

服务步骤

服务内容

交付内容

交付周期

载体构建

(1)基因合成及密码子优化(可选)

(2)片段构建至转移载体

(3)转移载体重组及重组杆粒提取

(1)表达质粒1-5ug

(2)表达质粒测序报告

(3)重组病毒

(4)蛋白产品0.1-5mg,纯度大于85%

(5)蛋白产品报告书

2-3

重组病毒及扩增

(1)重组杆粒转染细胞

(2)重组病毒扩增

(3)小试发酵及纯化

1-3

放大发酵

(1)放大发酵

(2)蛋白纯化

(3)蛋白质检报告

1-2


3.酵母蛋白表达服务

服务步骤

服务内容

交付内容

交付周期

载体构建

(1)基因合成及密码子优化(可选)

(2)片段构建至合适的表达载体

(1)表达质粒1-5ug

(2)表达质粒测序报告

(3)阳性菌株筛选报告

(4)最优表达菌

(5)小试表达结果

(6)纯化目的蛋白0.1-1mg

(7)蛋白产品检测报告

1-3

单菌落筛选

(1)载体线性化

(2)载体电转毕氏酵母细胞

(3)PCR筛选阳性转化子

1-3

小试表达

(1)挑4株阳性克隆进行表达小试验证

(2)表达分析验证(WB)

(3)可选:高拷贝菌株筛选

1-3

放大发酵

(1)放大发酵

(2)蛋白纯化

(3)蛋白质检报告

2-4


4.大肠杆菌-原核蛋白表达服务

服务步骤

服务内容

交付内容

交付周期

载体构建

(1)基因合成及密码子优化(可选)

(2)片段构建至合适的表达载体

注:可选择无标签,HIS标签,sumo,GST,TRXA及MBP

(1)表达载体质粒1-5ug液体质粒

(2)蛋白产品1-5mg,纯度大于85%

(3)蛋白产品报告书

1-2

表达测试

(1)小量发酵测试表达情况(可溶/包涵体表达)

(2)小量纯化测试

(3)其他可选:标签去除,包涵体纯化

1-3

交付及报告

(1) 交付蛋白

(2) 蛋白质检报告

<1周

应用案例

1.动物蛋白:



2.病毒衣壳蛋白:


3.分泌型表达:

注:M 蛋白marker;LD 纯化样品;FT 纯化流穿液;E1 洗脱蛋白



4.活性蛋白:



注:M 蛋白marker;LD 纯化样品;FT 纯化流穿液;E1-3 洗脱蛋白



5.HEK293胞内大分子酶表达与纯化(纯度大于95%):


注:M 蛋白marker;C 细胞全液;CL 细胞破碎液沉淀;LD 纯化上样样品;E0 亲和纯化洗脱样品;E1-3 离子柱纯化洗脱样品


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