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IP

实验原理

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)最早作为传统亲和柱色谱的改进方法而开发,是用于抗原检测和纯化的最广泛使用的方法之一。IP的原理非常简单:针对特定靶蛋白的抗体(单克隆或多克隆)与样品中的该靶标(例如细胞裂解液)形成免疫复合物。然后将免疫复合物捕获或沉淀在固定有抗体结合蛋白(例如蛋白A或G)的珠状支持物上,然后将未沉淀在珠子上的其他蛋白洗掉。最后,将免疫复合物从支持物上洗脱下来,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析,并常通过蛋白质印迹分析(Western blot)检测以验证抗原。

图1. P检测示意图(图片来源于Thermofisher网站)

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