RNA干扰 (RNA interference, RNAi)技术通过将与内源mRNA同源的小片段(19-23 bp)外源双链 RNA(siRNA)导入细胞中,引发细胞中相应mRNA高效特异性降解,从而导致特定基因表达沉默或下调(knock down)。
大鼠海马脑室注射1μg海人酸(KA)造癫痫模型,并注射AAV-Hsp70 shRNA及对照,24小时后从海马组织提取蛋白做western blot检测Hsp70蛋白表达水平,以验证体内干扰效果。20天后进一步计算抽搐评分比较对癫痫发作行为的影响。结果表明AAV-Hsp70 shRNA干扰效果良好,显著下调海马中Hsp70蛋白表达,并减少癫痫发作。
图2.海马Hsp70蛋白表达及大鼠抽搐评分(Hu F,et al.,Cell Reports,2019)
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