蛋白表达纯化-服务武汉枢密脑科学技术有限公司

服务

蛋白表达纯化

简介

蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。

服务内容

哺乳动物细胞瞬时表达服务

BEV-昆虫细胞蛋白表达服务

酵母蛋白表达服务

大肠杆菌-原核蛋白表达服务

周期: 4-6周

周期: 4-8周

周期:6-10周

周期: 2-6周

• 高效表达载体

• 高密度细胞培养

• 专用前导序列和接头

• 优化筛选的哺乳动物细胞表达系统

• 优化的表达载体

• 高效表达胞内和胞外蛋白

• 大规模蛋白表达生产能力

• 高滴度病毒包装技术

•简单的培养条件

•多种胞内、胞外表达方案

•优化筛选高表达菌株

• 大规模蛋白表达生产能力

• 快速、经济

• 多种表达载体和E. coli 细胞

• 丰富的周质空间表达经验

• 多种蛋白纯化和蛋白复性技术

服务信息

1.哺乳动物细胞瞬时表达服务

服务步骤	服务内容	交付内容	交付周期
载体构建	（1）基因合成及密码子优化（可选）（2）片段构建至合适的表达载体	（1）表达质粒1-5ug （2）表达质粒测序报告（3）蛋白产品0.1-5mg，纯度大于85%。（4）蛋白产品报告书	1-3周
细胞转染	（1）质粒转染细胞（2）发酵条件优化表达检测（3）小试样品纯化		1-2周
放大发酵	（1）放大发酵（2）蛋白纯化（3）蛋白质检报告		1-2周

2.BEV-昆虫细胞蛋白表达服务

服务步骤	服务内容	交付内容	交付周期
载体构建	（1）基因合成及密码子优化（可选）。（2）片段构建至转移载体。（3）转移载体重组及重组杆粒提取	（1）表达质粒1-5ug （2）表达质粒测序报告（3）重组病毒（4）蛋白产品0.1-5mg，纯度大于85%。（5）蛋白产品报告书	2-3周
重组病毒及扩增	（1）重组杆粒转染细胞（2）重组病毒扩增（3）小试发酵及纯化		1-3周
放大发酵	（1）放大发酵（2）蛋白纯化（3）蛋白质检报告		1-2周

3.酵母蛋白表达服务

服务步骤	服务内容	交付内容	交付周期
载体构建	（1）基因合成及密码子优化（可选）。（2）片段构建至合适的表达载体。	（1）表达质粒1-5ug （2）表达质粒测序报告（3）阳性菌株筛选报告（4）最优表达菌（5）小试表达结果（6）纯化目的蛋白0.1-1mg （6）蛋白产品检测报告	1-3周
单菌落筛选	（1）载体线性化（2）载体电转毕氏酵母细胞（3）PCR筛选阳性转化子		1-3周
小试表达	（1）挑4株阳性克隆进行表达小试验证（2）表达分析验证（WB）可选：高拷贝菌株筛选		1-3周
放大发酵	（1）放大发酵（2）蛋白纯化（3）蛋白质检报告		2-4周

4.大肠杆菌-原核蛋白表达服务

服务步骤	服务内容	交付内容	交付周期
载体构建	（1）基因合成及密码子优化（可选）（2）片段构建至合适的表达载体注：可选择无标签，HIS标签，sumo，GST，TRXA及MBP	（1）表达载体质粒1-5ug液体质粒（2）蛋白产品1-5mg，纯度大于85% （3）蛋白产品报告书	1-2周
表达测试	（1）小量发酵测试表达情况（可溶/包涵体表达）（2）小量纯化测试（3）其他可选：标签去除，包涵体纯化		1-3周
交付及报告	（1）交付蛋白（2）蛋白质检报告		＜1周

应用案例

案例1 动物蛋白

注：M 蛋白marker；LD纯化样品；FT纯化流穿液；E1-2洗脱蛋白

案例2 病毒衣壳蛋白

注：M 蛋白marker；LD纯化样品；FT纯化流穿液；E1-2洗脱蛋白

案例3 分泌型表达

注：M 蛋白marker；LD纯化样品；FT纯化流穿液；E1洗脱蛋白

案例4 活性蛋白

注：M 蛋白marker；LD纯化样品；FT纯化流穿液；E1-3洗脱蛋白

案例5 HEK293胞内大分子酶表达与纯化（纯度大于95%）

注：M 蛋白marker；C 细胞全液；CL细胞破碎液沉淀；LD纯化上样样品；E0亲和纯化洗脱样品；E1-3离子柱纯化洗脱样品