实时荧光定量PCR
简介
实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入可与DNA双链特异性结合的荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最终通过相对定量或绝对定量的方法确定各个样本的本底表达量。qPCR检测常用的两种方法：染料法和TaqMan探针法。
具体实验流程如下：
应用
1）mRNA、micRNA、lncRNA、cirRNA的表达检测
2）SNP的基因型分析
3）基因copy数分析
4）病毒检测
5）微生物诊断
6）测序数据验证
服务内容：
客户提供：
1）基因名称及详细的样品信息；
2）实验样本，保证样本质量；
3）具体实验需求。
公司提供：
1）详尽实验报告及结果分析
2）中间实验数据
送检与交付标准
样品类型
样品需求
保存条件
运输条件
动物组织
单个样品>0.1g，2mlEP管或冻存管装，不要过量；样本应尽量新鲜，如不能立即提取蛋白或核酸，应液氮速冻后冻存于-80℃或更低，冻存样本避免反复冻融以致降解
-80℃
干冰
种子样本
去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本，单个样品>0.2g。
-80℃
干冰
细胞样本
1. 总RNA或蛋白：10E+6 cell/指标
2. 浆/核RNA或蛋白：10E+7 cell/指标
3. 线粒体RNA或蛋白：20E+7 cell/指标
注：样本尽量新鲜，细胞收取后直接加Trizol（QPCR检测）或直接冻存于-80℃；若细胞处理（加药、转染、感染）后状态差应酌情加大收样量。
-80℃
干冰
全血/血清样本
用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml； -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。
-80℃
干冰
石蜡包埋样本
由标准的石蜡包埋盒包埋的石蜡块，有效厚度大于 0.1cm； 新鲜的 FFPE 组织切片，每片厚度不超过 10μm，2~8 张，表面积不超过 250mm2。
-20℃
冰袋
抗体
1. 按样本种属提供满足相应实验要求的抗体；
2. 按抗体说明书要求寄送，尽量避免分装；如分装，确保量足够进行实验，并提供抗体说明书。
3.保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记，抗体的量应大于实验所需的量。
-20℃
冰袋
引物
干粉，≥1 OD，如进行预实验，每个基因至少提供两对引物， 附带公司引物合成单。
-20℃
冰袋或常温
1. 相对定量
2. 绝对定量
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