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活动依赖产品


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背景

     当细胞内无四环素或其衍生物多西环素时,抑制型Tet-off基因调控表达系统可开启目的基因的表达,而当有多西环素或者四环素时,目的基因表达关闭。激活型Tet-on基因调控系统在没有多西环素或者四环素时,基因表达关闭,而在有多西环素或者四环素可激活下游基因的表达。利用上述系统制备的rAAV病毒产品可在有无四环素的调节下,开启或关闭目的基因的表达,可应用于辅助病毒、光遗传、化学遗传及重组酶等中,控制功能基因的表达。


TRE四环素诱导系统、tTA四环素诱导系统

      Tet(四环素)是一种用于诱导基因表达的调控系统,是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的。其包括抑制型系统Tet-off和激活型系统Tet-on,其中后者由前者演化而来。Tet-off基因调控表达系统由调节表达载体和反应表达载体两部分组成,调节表达载体含有启动Tet转录活化因子(tetracycline transcriptional activator,tTA)表达的启动子,反应表达载体由TRE-tight启动子(TRE3g)及目的基因组成。当细胞内无四环素或其衍生物多西环素(doxcycline,Dox)存在时,tTA与TRE结合,从而使目的基因得以表达;而当有多西环素或者四环素存在时,tTA中的Tet R的构象会发生变化,随后tTA从TRE上脱落,目的基因表达关闭;当调节蛋白质由tTA变为逆向Tet转录活化因子(reverse tetracycline transcriptional activator,rtTA)后,抑制型Tet-off基因表达调控系统便变成了激活型Tet-on调控系统。即在没有多西环素或者四环素时,其不能结合到TRE上,因而基因表达关闭;而在有多西环素或者四环素存在时则其会结合在TRE上,从而激活下游基因的表达。


仅供科研使用

滴度:≥2.00E+12 vg/mL;
血清型:9型;

tTA:tetracycline transcriptional activator,Tet转录活化因子。

TRE3G:四环素诱导表达,时间特异性启动/关闭。

RAM:optimized synthetic activity-regulated promoter,优化合成的活动依赖启动子。

d2TTA:与传统tTA相比,使用d2tTA可显著降低基础表达、更严格的Dox调控及提高诱导倍数7-8倍。


图1.RAM启动子(PRAM)和rAAV-RAM系统



其他相关rAAV产品

c-Fos四环素诱导系统、E-SARE四环素诱导系统。


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