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犬腺病毒

犬腺病毒CAV-2

工具简介

犬腺病毒2(CAV-2)属于腺病毒科,遗传物质为双链DNA,克隆能30~36Kd,直径70-90nm,是一种非人类病原体,可在犬中引起轻度传染性呼吸道疾病。CAV基因组中含有4个早期转录区和5个晚期转录区,外源基因插入主区域为早期转录区的E1/E3和E4区。CAV的逆行能力依赖于柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR),由于人类和大小鼠中缺乏该病毒受体,因此除非使用异常高滴度的病毒,CAV-2是一种对人类和大小鼠具有最小免疫原性和细胞毒性反应性的可靠遗传载体。

除了CAV病毒的受体功能外,CAR也是病毒内化,内吞作用和轴突运输所必需的细胞粘附分子。该受体在神经元的突触前位点高度富集,但在神经元的胞体和树突中以低密度存在。这种区域化的CAR表达使CAV-2可以逆轴突转运到胞体,并具有在胞体部位驱动基因表达的潜能。由于这种逆行能力,CAV病毒在注射到大脑区域时,除了在注射部位的神经元外,还逆行感染了支配注射部位的投射神经元,因此在研究远程投射的解剖结构和功能时特别有用,是绘制大脑区域之间远程连接的有力工具。

CAV的较大物理尺寸为执行向小核中的立体定向注射的神经科学家提供了优势。与较小的腺相关病毒(AAV)(直径22 nm)相比,CAV病毒(直径约90 nm)保留在注射部位附近。例如,0.25–0.5μl的CAV从注射部位的中心平均扩散200μm,而0.25μl的rAAV2-retro则扩散四倍。CAV的这种受限制的扩散在研究小结构时很有用,例如视神经道核与背末尾核(NOT / DTN)的复合体,PAG或CLA。


应用

1.大片段(7~36kb)基因插入片段的表达载体;

2. 绘制各种类型的投射神经元的输入和输出神经支配,并记录或操纵其活动;

3. 远距离传递并长期表达荷载基因,研究基因功能及一些神经变性疾病、肿瘤的治疗。


参考文献

1. CAV-2 — why a canine virus is a neurobiologist’s best friend:https://doi.org/10.1016/j.coph.2015.08.004

2. Canine Adenovirus 2: A Natural Choice for Brain Circuit Dissection:DOI:10.3389 / fnmol.2019.00071


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