阿尔茨海默病模型构建及药效服务

一、疾病机理

     阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）又叫老年性痴呆，是一种中枢神经系统变性病，起病隐袭，病程呈慢性进行性，是老年期痴呆最常见的一种类型。主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状。AD的病因及发病机制尚未阐明，特征性病理改变为β-淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结，以及神经元丢失伴胶质细胞增生等。

二、模型构建

     1）基底前脑胆碱能神经元，海马和皮质及其之间的通路，是学习记忆功能的重要结构基础。脑内胆碱能神经系统退化是AD疾病主要标志之一，损伤Meynert基底核可以用于模拟AD模型。外科手术方法切断穹窿-海马伞区域形成损伤。

     2）两种重要的乙酰胆碱受体为M受体与N受体，阻滞乙酰胆碱的M受体可以构建AD模型。大鼠腹腔注射乙酰胆碱M受体拮抗剂东莨菪碱，可阻断大脑皮质中神经递质乙酰胆碱与M受体结合，造成胆碱能神经系统功能障碍。

     3）AD的发病机理与淀粉样前体蛋白（APP）有密切关系。APP常染色体显性改变导致遗传性早发阿尔茨海默病，结果或许也是蛋白水解过程的改变。APP可以被α-，β-，γ-蛋白酶分解；其中β-蛋白酶和γ-蛋白酶的连续作用可使APP被分解产生有毒性的Aβ。Aβ可以导致脑内老年斑的形成和神经细胞的凋亡，从而导致AD发病。淀粉样前体蛋白APP是一种在多种组织中表达的膜内在蛋白，并且集中在神经元的突触。

     4）AD患者脑内铝元素含量是正常人脑内铝元素含量的30倍，另外铝元素可导致脑组织中神经原纤维缠结的形成。

     5）AD为年龄相关疾病，衰老因素在AD发病过程中起着重要作用，衰老所特有的疾病生理变化及其他病变的影响，是年轻动物制作的模型所不能代替的。通过筛选选择带有认知和记忆缺失的个体，它们的行为与老年人和AD患者的认知损害相类似，同时还可出现某些相应的脑组织病变。

     6）鼠的平均寿命在30个月左右，通常大鼠24个月，小鼠18~20个月以上视为老年鼠。筛选方法包括定向航线实验和空间探索实验。

三、造模后检测

1）认知功能检测；

2）免疫组化检测（GFAP，NeuN，ChAT，APP，Aβ_1-42，p-Tau等）等。

表1.认知功能检测