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产品及应用

AAV/LV介导基因过表达

基因表达调控-基因稳定过表达及敲低

CRISPR/Cas9系统是目前被广泛运用的基因编辑系统,其原理是由CRISPR转录产生的sgRNA介导Cas9核酸酶靶向目标序列,对序列进行切割。Cas9 的核酸酶剪切活性取决于两个结构域:RuvCHNH。当这两个结构域同时处于失活状态时,Cas9将不具有核酸酶活性,成为dCas9(dead Cas9)CRISPR-dCas9系统即是dCas9与转录激活因子(如VP64VPRSAMSunTag)或转录抑制因子(如KRAB)融合后,结合sgRNA能促进或抑制目的基因的表达。


1 CRISPR-dCas9系统调控内源基因(Gilbert et al., Cell, 2013


应用

CRISPR-dCas9转录激活:可实现目的基因在内源环境中过表达、诱导iPSC、激活沉默基因、遗传缺陷补偿等;

CRISPR-dCas9转录抑制: 可实现抑制目的基因表达、分析代谢途径、敲低特定基因转录量以研究基因功能、可与CRISPR/Cas9 Gene KnockoutRNAi 技术联合作用等。




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