生活中特定的刺激如疼痛、令人不适的环境等都可能使人产生强烈的厌恶或者逃避情绪，这种厌恶对人的生理或心理健康都可能产生长期的负面影响。药物成瘾后的戒断也会导致厌恶的形成，从而加重药物成瘾的反复发生。然而，厌恶的形成机制仍未明确。而当这种厌恶情绪与某种特定的位置长期关联在一起，即导致条件性位置厌恶（conditioned place aversion, CPA）的形成，CPA的中枢环路仍在持续探索中。

2023年7月17日，中山大学曹铭辉教授、黄婉教授、欧阳汉栋教授课题组在Communications Biology期刊发表了题为“Selective activation of AKAP150/TRPV1 in ventrolateral periaqueductal gray GABAergic neurons facilitates conditioned place aversion in male mice”的研究论文。在这项工作中，研究人员通过小鼠成功建立了两种CPA动物模型，分别是疼痛诱导的CPA模型及吗啡戒断下诱导的CPA模型，结合化学遗传、立体定位等方法，明确了腹外侧中脑导水管周围灰质的氨基丁酸能神经元的AKAP150/p-TRPV1蛋白水平在CPA中的重要作用。

如图1所示，研究人员通过将不利刺激与随机匹配的CPA训练模具中的特定隔间相关联建立CPA模型。通过连续4天夹后脚皮肤或连续4天给予吗一啡后注射纳洛酮诱导戒断的方式分别建立疼痛诱导的CPA模型及吗一啡戒断诱导的CPA模型。

CPA模型成功建立后，通过免疫荧光、免疫印迹方法检测腹外侧中脑导水管周围灰质（ventrolateral periaqueductal gray, vlPAG）的AKAP150水平（图2）。结果发现在两种CPA模型中，AKAP150的水平都有显著的升高，说明vlPAG中的AKAP150对CPA的形成有重要作用。

图2. vlPAG的AKAP150水平在两个CPA模型中升高。

既往研究探究了vlPAG中不同种类神经元在厌恶形成中的作用，其中以谷氨酸能神经元、氨基丁.酸能神经元为主。作者通过免疫荧光手段验证了谷氨酸能神经元（CamkII标记）及氨基丁.酸能神经元（Vgat1标记）在vlPAG的表达。接着，通过化学遗传手段分别激活或抑制vlPAG中的谷氨酸能神经元或氨基丁.酸能神经元后对CPA模型的CPA反应进行比较，结果显示只有抑制vlPAG的氨基丁.酸能神经元可减轻其CPA反应，而激活氨基丁.酸能神经元、激活或抑制谷氨酸能神经元都未对CPA反应产生影响。以上结果说明，抑制vlPAG的氨基丁.酸能神经元是减轻CPA反应的有效手段。

图3. 抑制vlPAG的氨基丁.酸能神经元减轻CPA反应。

接着，作者研究了vlPAG不同种类神经元中的AKAP150水平对CPA反应的影响。作者选择性敲除氨基丁.酸能神经元或谷氨酸能神经元中的AKAP150，如图4结果显示，敲除氨基丁.酸能神经元中的AKAP150后小鼠的CPA反应减轻了，但敲除谷氨酸能神经元中的AKAP150后小鼠的CPA反应无明显变化。以上结果说明，vlPAG的氨基丁.酸能神经元而非谷氨酸能神经元表达的AKAP150对CPA的形成起重要作用。

图4. 敲除vlPAG氨基丁.酸能神经元的AKAP150减轻CPA反应。

既往的研究报道TRPV1对厌恶的发展有重要作用，且AKAP150在TRPV1与PKA等分子的相互作用中起着关键的调控角色，作者进一步探究了vlPAG中TRPV1对CPA反应的影响。图5结果显示，在两种CPA模型中，总TRPV1水平无明显变化，但磷酸化的TRPV1即p-TRPV1水平可见明显升高。接着，作者选择性敲除氨基丁.酸能神经元的TRPV1后小鼠的CPA反应减轻了。以上结果说明，vlPAG的氨基丁.酸能神经元的p-TRPV1水平对CPA的形成起重要作用。

图5. 敲除vlPAG氨基丁.酸能神经元的TRPV1减轻CPA反应。

接着，作者进一步探究vlPAG氨基丁.酸能神经元中AKAP150与p-TRPV1的关系。通过化学遗传的方式敲除vlPAG氨基丁.酸能神经元中的AKAP150后，p-TRPV1的水平明显下调（图6）。以上结果说明，敲除vlPAG氨基丁.酸能神经元中的AKAP150可能通过下调TRPV1的磷酸化水平从而减轻CPA反应。

图6. 敲除vlPAG氨基丁.酸能神经元的AKAP150下调p-TRPV1表达水平。

综上，结合化学遗传、立体定位等技术，作者揭示vlPAG在CPA形成中的重要作用，选择性抑制vlPAG氨基丁.酸能神经元中的AKAP150/p-TRPV1通过可有效减轻CPA反应，未来可研究其作为控制CPA反应的重要手段。中山大学孙逸仙纪念医院曹铭辉教授、中山大学肿瘤防治中心麻醉科黄婉教授、欧阳汉栋教授为文章的共同通讯作者。麻醉科白晓晖、张坤、欧超鹏是文章的第一作者，文中用到的病毒均由枢密公司构建生产。项目得到了国家自然科学基金和广东省自然科学基金的资助。

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通讯作者介绍：

曹铭辉，教授，博士生导师，中山大学孙逸仙纪念医院麻醉科主任，深汕院区副院长，主持多项国家自然科学基金，作为通讯作者发表SCI论文30余篇。黄婉，医学博士，副主任医师，硕士生导师，中山大学肿瘤防治中心科教处临床技能培训中心主任，住培麻醉科基地教学主任，AHA中心主任，主持多项国家、省部级课题多项，发表第一或通讯作者高水平论文20余篇。欧阳汉栋，主任医师，博士生导师，中山大学肿瘤防治中心麻醉科，主持多项国家自然科学基金，作为通讯作者发表SCI论文10余篇。

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