2025-08-19 阅读量:19
一、载体简介
腺病毒(Adenovirus,AdV)是直径约为70-100 nm、空间结构为立体对称的20面体、衣壳由252个壳粒组成的无包膜线性双链DNA病毒。目前已知的人腺病毒血清型有51种,根据组织嗜性不同被分成ABCDEF六个不同亚群,其中C亚群的第2和第5血清型为最常见的腺病毒载体。基于人腺病毒5型(Ad5)改造的载体使用较为广泛,其特点是人为地删除了E1和E3基因,导致腺病毒失去复制能力和一定程度上降低免疫原性,使得Ad5成为一种广泛、安全、有效的基因运输载体。
腺病毒除了用作基因治疗药物载体和疫苗载体以外,在基础生物医学研究上也受到科研工作者的青睐,可以搭载最高达8 kb大小的目的基因。
腺病毒特性
1.腺病毒基因组不会整合到宿主细胞中,可以直接进行转录和翻译,相比RNA病毒起效更快。
2.腺病毒感染能力强,转导效率高,是体外难感染细胞最佳选择;对于细胞实验在感染后36-48小时会出现表达高峰;对于动物实验则在5天左右即达到表达高峰,表达效果可维持1-3周左右。
3.腺病毒具有嗜肝性,尾静脉注射主要感染肝脏。
二、原理介绍
腺病毒感染细胞的过程遵循特定机制:首先,病毒通过其表面的纤突蛋白与细胞表面的CAR(柯萨奇病毒-腺病毒受体)结合,完成初始黏附;随后,病毒五邻体蛋白上的精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸(RGD)序列与细胞表面的整合素αvβ3、αvβ5相互作用,介导病毒进入细胞。
在这一机制中,Ad5型腺病毒的高效感染高度依赖宿主细胞表面的CAR和αvβ类整合素。然而,部分免疫细胞的细胞膜上缺乏这些受体,导致Ad5对这类细胞的感染效率较低。研究发现,新血清型腺病毒对造血干细胞具有很强的靶向感染能力,其感染机制不依赖CAR,可弥补Ad5在特定细胞感染中的不足。基于此,枢密科技构建了新型腺病毒,旨在结合两者优势——既保留Ad5的高效感染特性,又借助新血清型的靶向性,拓宽腺病毒对特定细胞(如造血干细胞、部分免疫细胞)的感染范围。
三、感染效果
下图所示为我司测试结果,供您参考。
小结
·新载体极大改善对免疫细胞的感染能力;
·对贴壁细胞的感染能力无影响,可以通用。
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