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rAAV-EF1a-DIO-hChR2(H134R)-P2A-eNpHR3.0-EGFP-WPREs

Cat#.PT-2157

ReceptoreNpHR3.0

PromoterEf1α

Description

产品货号

PT-2157

描述

广谱启动子EF1a调控Cre依赖的光激活元件和光抑制元件的表达,在有Cre时ChR2-eNpHR3.0-EGFP表达,无Cre时ChR2-eNpHR3.0-EGFP不表达;ChR2和eNpHR3.0用2A连接,分开表达。

血清型

1, 2, 5, 6, 8, 9, rh10, DJ, B10, PHP.eB, PHP.S,

MaCPNS1/2, retro, anc80l65...更多血清型请咨询

病毒类型 腺相关病毒
规格 20μL,60μL,100μL
滴度 ≥2×10^12vg/ml
存储条件

-80℃保存













光遗传抑制产品说明书
仅供科研使用
使用前请仔细阅读说明书
rAAVRecombinant adeno-associated virus重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少引起免疫应答),表达时间长,且能感染多种细胞和组织。
病毒用途:通过rAAV病毒载体在神经元表达光敏感离子通道蛋白,如eNpHR3.0、Arch等,可实现特异性抑制神经元,探究光刺激对神经元、神经回路及动物行为的影响。
启动子Ef1α 强启动子,人类靶向延长因子 1α(EF1A)基因,可在多数种类细胞中稳定表达,尤其是某些CMV启动子会发生沉默的细胞,如干细胞, 1178bp。

功能基因eNpHR3.0NpHR是光驱动的氯离子泵,属于Halorhodopsin。常见的版本为NpHR3.0,其在NpHR的基础上添加了内质网顺向运输信号和高尔基体向细胞膜转运信号,改善了其在细胞膜上的表达状况,是最常用的光抑制工具。NpHR通常用570nm左右的黄光驱动,可以和hChR2(H134R)同时使用。

hChR2(H134R)是ChR2最常见形式,h指代该基因的编码序列经过适用人密码子表的优化,H134R指第134位的组氨酸突变为精氨酸,这个突变抑制了ChR2对H+的结合,增加了Na+的通过能力,从而增加了分子整体的电导率,进而增加了光照下激发的内向电流。一般用470nm左右的蓝光激发。

荧光蛋白EGFP绿色荧光蛋白,激发波长488nm,发射波长507nm。

调控元件DIODouble-floxed inverse Orientation,是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达,在有Cre的情况下目的基因才能正常表达。

2A2A序列是一个短肽序列,当核糖体翻译到它的时候会自动跳开,继续翻译下游的阅读框,从而使同一个阅读框翻译成两个独立的蛋白。常用的2A序列包括T2A和P2A。运用于非融合表达中。


注意
1.4℃短期保存;-80℃长期保存;
2.-80℃可保存6个月以上,每冻融一次,滴度降低10%,应避免反复冻融;如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前重新测定病毒滴度;
3.根据实验需要,病毒可适当稀释且分装成每次实验所需体积。

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