PT-1182-现货病毒产品库武汉枢密脑科学技术有限公司

rAAV-CaMKIIa-DIO-OChIEF-P2A-dTomato-WPRE-bGH polyA

Cat#.PT-1182

ReceptorOChIEF(E163A/T199C)

PromoterCaMKIIa

Description

产品货号	PT-1182
描述	兴奋性神经元特异性启动子CaMKIIa调控Cre依赖的光激活元件和dTomato的表达，在有Cre时OChIEF-dTomato表达，无Cre时OChIEF-dTomato不表达；OChIEF和dTomato用2A连接，分开表达
血清型	1, 2, 5, 6, 8, 9, rh10, DJ, B10, PHP.eB, PHP.S, MaCPNS1/2, retro, anc80l65...更多血清型请咨询
病毒类型	腺相关病毒
规格	20μL，60μL，100μL
滴度	≥2×10^12vg/ml
存储条件	-80℃保存

光遗传激活产品说明书

仅供科研使用
使用前请仔细阅读说明书
rAAV：Recombinant adeno-associated virus，重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体，安全性高（目前还没有发现rAAV对人体致病），免疫原性低（感染后很少引起免疫应答），表达时间长，且能感染多种细胞和组织。
病毒用途：通过rAAV病毒载体在神经元表达光敏感离子通道蛋白，如ChR2、ChrimsonR等，可实现特异性兴奋神经元，探究光刺激对神经元、神经回路及动物行为的影响。
启动子：CaMKIIa，椎体神经元/兴奋性神经元启动子，1293bp。
功能基因：OChIEF：ChIEF是ChR1和ChR2两个蛋白的融合体，同时在170位的Ile突变为Val。这个蛋白的特点是长时间光照下，平台期电流和峰值电流的比值较大，也就意味着光照下通道的失活较少，适合长时间刺激。Ile的突变加快了通道的关闭速度，使得ChIEF适合做高频的刺激使用。Karl实验室比较过ChIEF和hChR2(E123A)在pv（小血清蛋白）神经元中做高频刺激，效果相当。OChIEF是经过密码子优化的版本。激发光波长473nm，高频光激活适用。
荧光蛋白：dTomato：红色荧光蛋白，激发波长554nm，发射波长581nm。

调控元件：DIO：Double-floxed inverse Orientation，是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达，在有Cre的情况下目的基因才能正常表达。

2A：2A序列是一个短肽序列，当核糖体翻译到它的时候会自动跳开，继续翻译下游的阅读框，从而使同一个阅读框翻译成两个独立的蛋白。运用于非融合表达中。常用的2A序列包括T2A和P2A。

注意：
1.4℃短期保存；-80℃长期保存；
2.-80℃可保存6个月以上，每冻融一次，滴度降低10%，应避免反复冻融；如果病毒储存时间超过6个月，建议在使用前重新测定病毒滴度；
3.根据实验需要，病毒可适当稀释且分装成每次实验所需体积。

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