PT-0618-现货病毒产品库武汉枢密脑科学技术有限公司

rAAV-VGAT1-DIO-hM4D(Gi)-mCherry-WPRE-hGH polyA

Cat#.PT-0618

ReceptorhM4D(Gi)

PromoterVGAT1

Description

化学遗传抑制产品说明书

仅供科研使用
使用前请仔细阅读说明书
rAAV：Recombinant adeno-associated virus，重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体，安全性高（目前还没有发现rAAV对人体致病），免疫原性低（感染后很少引起免疫应答），表达时间长，且能感染多种细胞和组织。
病毒用途：化学遗传学技术/DREADDS（designer receptors exclusively activated by designer drugs，由设计药物专一激活的设计受体）技术可以用来调控神经元或其他类型细胞的活动。例如将病毒注射到小鼠的特定脑区，hM4D(Gi)在小鼠中表达后，通过腹腔注射或饮食等方式给CNO（clozapine-N-oxide，N-氧化氯氮平），可以实现长时间范围（小时量级）的对神经元的激活。利用DREADDs技术可以探究与记忆形成、食物摄入调节和觉醒等相关的神经元、神经回路。
启动子：VGAT1，小鼠GABA能神经元启动子，1800bp。
功能基因：hM4D(Gi)：是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M4上改造的仅对CNO有反应的人工受体，不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里，CNO结合hM4D(Gi)后，激活Gi蛋白偶联的内向钾离子通道GIRK，使得细胞膜超极化，抑制神经元细胞动作电位发放。在不表达GIRK或是Gi的细胞中，hM4D(Gi)的功能会有所不同。

荧光蛋白：mCherry：红色荧光蛋白，激发波长587nm，发射波长610nm。

调控元件：DIO：Double-floxed inverse Orientation，是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达，在有Cre的情况下目的基因才能正常表达。

注意：
1.4℃短期保存；-80℃长期保存；
2.-80℃可保存6个月以上，每冻融一次，滴度降低10%，应避免反复冻融；如果病毒储存时间超过6个月，建议在使用前重新测定病毒滴度；
3.根据实验需要，病毒可适当稀释且分装成每次实验所需体积。

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