● 外泌体是直径30-150nm*的细胞外囊泡
● 外泌体含有核酸、蛋白质、脂质等多种生物大分子
● 外泌体几乎存在与所有体液中
● 不同文献报道的直径不全相同
● 外泌体参与癌症的发生、发展、转移、耐药
● 外泌体可以成为癌症的诊断及预后的生物学标志
● 外泌体有望成为靶向治疗的药物载体
差速超速离心是主流方案,同时也是高影响力文章常用的方法。
方法主要有:电镜观察、粒径分析(NTA)、免疫法(Western Blot或流式分析),
三种方法各有优缺点,相互佐证才能确定样品中含有外泌体。
主要有三种方法:BCA蛋白定量、粒径分析和ELISA。
通常选用BCA法或粒径分析来定量外泌体。
亲脂性染料法
常用的亲脂性染料有:PKH-67(绿色)/PKH-26(红色)DiD(红色)/ DiR(红色)/DiI(红色)/DiO(绿色)
通过慢病毒载体方法,将CD63,CD81等膜蛋白带上荧光标记,带荧光的膜蛋白会表达至外泌体膜上。
以二代测序和蛋白质组学为主
结合细胞功能实验/分子实验/动物实验 探究外泌体作用机制
外泌体分离 |
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超速离心 |
1周 |
外泌体鉴定 |
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电镜 |
1-2周 |
粒径分析 |
1-2周 |
Western Blot或流式分析 |
2-3周 |
外泌体定量 |
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BCA法 |
2个工作日 |
外泌体示踪 |
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亲脂性染料标记外泌体 |
1-2周 |
荧光蛋白标记外泌体marker |
2-3周 |
外泌体组学 |
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外泌体转录组测序 |
咨询 |
外泌体蛋白质组学 |
咨询 |
外泌体功能研究 |
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具体项目请咨询 |
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细胞上清(50-100mL , 保证细胞数量≥10^6)
血清/血浆 3-5mL
(其他类型样本请咨询)
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