肿瘤耐药

药物治疗是癌症治疗的主要方式之一，但无论是化疗药物、靶向药物、免疫治疗药物，都有可能发生耐药。一旦出现耐药（尤其是多药耐药），癌症进展加快或复发，最终导致治疗失败。

一直以来，肿瘤耐药都是癌症研究的重点方向。引起肿瘤耐药的因素多且复杂，现已知耐药发生的机制包括肿瘤异质性、DNA损伤修复、细胞凋亡抑制、上皮间质转化、药物排出增加/吸收下降、药物活性下降、药物代谢改变、药物靶点改变、肿瘤微环境等，这些机制可以单独或组合发生在同一位患者身上。而表观遗传改变、转运蛋白异常、非编码RNA异常、外泌体等都可能直接或间接导致这些耐药机制发生。

研究思路

解决肿瘤耐药，要明确耐药发生的机制，在此基础上测试新的药物或联合用药策略，为患者制定个性化治疗法案，确保药物更好的发挥作用，克服或逆转耐药。

肿瘤耐药机制研究，可以从大规模筛选异常表达基因开始，逐步探索异常基因的分子机制、相关信号通路、与肿瘤的关系、耐受药物的关系，从而探寻新靶点、新药物、新的治疗手段。

耐药研究模型

服务流程

技术路线：

数据节选：

1. 舒尼替尼耐药肾癌细胞lncARSR高表达

肾癌耐药细胞模型：药物敏感肾癌细胞系移植裸鼠，舒尼替尼处理，取P3代小鼠肿瘤细胞，发现耐药性明显升高；

筛选差异基因：lncRNA芯片检测耐药细胞与敏感细胞lncRNA表达，得到候选差异表达lncRNA；

分子水平验证：Northern Blot实验证明lncARSR在耐药肾癌细胞中高表达；

临床样本验证：RT-qPCR及原位杂交实验证明舒尼替尼治疗后复发病人样本中lncARSR高表达；

干扰lncARSR表达：构建shRNA载体，慢病毒法导入细胞；

细胞功能验证：CCK-8及克隆形成实验证明lncARSR是肾癌细胞耐药的必要条件；

动物实验验证：皮下成瘤实验证明干扰耐药肾癌细胞lncRNA表达，可恢复其耐药性。

2. 外泌体包裹lncARSR诱导其他细胞耐药

分子水平验证：RT-qPCR证明耐药细胞培养基中存在lncARSR，耐药细胞外泌体相较于敏感细胞外泌体lncARSR高表达；

细胞功能验证：CCK-8实验证明耐药细胞外泌体可促进敏感细胞耐药；

动物实验验证：药物敏感肾癌细胞皮下成瘤，瘤内注射耐药细胞外泌体或过表达lncARSR的敏感细胞外泌体均可提高肿瘤耐药性。

3. lncARSR通过ceRNA机制发挥作用

荧光素酶报告基因实验及免疫印迹实验证明lncARSR通过ceRNA机制，吸附miR-34a和miR-449a，而AXL和c-MET是miR-34a和miR-449a靶蛋白，过表达lncARSR将导致AXL和c-MET蛋白水平上调。

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